常用色谱柱性能原理介绍

作者简介：某知名药企分析总监，从事药物分析研发十余年工作经验

三、不同的化学键合

普通C18色谱柱为何不耐受100%水相？？？

原因就是疏水性！

• 流动相（100%水）极性太大，C18（疏水性）会本能地把水排除在孔外，这种从色谱柱填料细孔中将水排斥出去的过程为“去湿化”，过去我们称之为“固定相”塌陷。C18长链在纯水条件下会抱团，抱团之后就很难分开，因为C18里面被抱团在内部的那一部分就失去作用了，然后柱效就下降，且不易恢复。

• 清洗色谱柱：

  流动相（100%水相）清洗时，会被推出小孔外，引起色谱柱多孔内表面及固定键合相的去湿现象。虽然可以选择增加色谱柱前段压力的方式，使得纯水相浸入基质的多孔内，但却没有办法实现C18链的有效浸湿，这种现象发生的时候，即使你用一天的时间冲洗，色谱柱也不会得到清洁。

四、表面多孔颗粒SPP色谱柱

• 表孔硅胶颗粒色谱柱：Agilent Poroshell 120系列，Waters CORTECS系列，YMC Mereoric Core系列等。

• 将多孔硅胶壳熔融到实心的硅核表面制备而成，一般被称作核壳core shell、熔融核心fused core、多孔外壳porous shell填料。

• 目前广泛使用的表面多孔硅胶颗粒色谱柱粒径为2.7μm，其拥有与UHPLC用亚2μm色谱柱匹敌的分离能力，而使用压力仅为亚2μm柱的一半，使得在常规的液相色谱仪上就能够实现超高效液相仪的效果。研究表明，表面多孔硅胶颗粒色谱柱可通过减小Van Deemter方程中的三个参数来提高色谱性能。

H = A + B/u + C×u

       ①  表面多孔硅胶颗粒填充更均匀，降低A值；

       ②  更小的颗粒孔隙率降低轴向扩散（不经过实芯），降低B值；

③  表面多孔硅胶颗粒可提高热传递，减缓径向温度梯度，降低C值。

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